• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氯霉素Chl
• 筛选标记：遗传霉素G418
• 克隆菌株：大肠杆菌DB3.1
• 质粒简介：          pGWB454是一个植物细胞Gateway系统表达质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G2191IAB62.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported               12363 bp ds-DNA     circular SYN 19-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..12363

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     misc_feature    54..78

                     /label=RB T-DNA repeat

                     /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     promoter        812..1157

                     /label=CaMV 35S promoter

                     /note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic

                     virus"

     protein_bind    1179..1303

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR1

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     promoter        1340..1370

                     /label=lac UV5 promoter

                     /note="E. coli lac promoter with an ""up"" mutation"

     CDS             1424..2083

                     /codon_start=1

                     /gene="cat"

                     /product="chloramphenicol acetyltransferase"

                     /label=Chl

                     /note="confers resistance to chloramphenicol"

                     /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL

                     KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS

                     LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM

                     DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"

     CDS             2425..2730

                     /codon_start=1

                     /gene="ccdB"

                     /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"

                     /label=ccdB

                     /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 

                     propagated in standard E. coli strains."

                     /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRMVIPLASARLLSDK

                     VSRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"

     protein_bind    complement(2771..2895)

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR2

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     CDS             2906..3583

                     /codon_start=1

                     /product="monomeric derivative of DsRed (Campbell et al., 

                     2002)"

                     /label=mRFP1

                     /note="mammalian codon-optimized"

                     /translation="MASSEDVIKEFMRFKVRMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAK

                     LKVTKGGPLPFAWDILSPQFQYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGV

                     VTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASTERMYPEDGALKGEIKM

                     RLKLKDGGHYDAEVKTTYMAKKPVQLPGAYKTDIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHS

                     TGA"

     terminator      3605..3857

                     /label=NOS terminator

                     /note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"

     terminator      4039..4291

                     /label=NOS terminator

                     /note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"

     CDS             complement(4681..5475)

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=Neo

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKARMPDGDDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     promoter        complement(5496..5711)

                     /function="NOS promoter"

                     /label=NOS promoter

                     /note="nopaline synthase promoter"

     misc_feature    5885..5909

                     /label=LB T-DNA repeat

                     /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     CDS             6430..7221

                     /codon_start=1

                     /gene="aadA"

                     /product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy, 

                     1985)"

                     /label=Spe

                     /note="confers resistance to spectinomycin and 

                     streptomycin"

                     /translation="MGEAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH

                     SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK

                     RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF

                     EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP

                     VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"

     rep_origin      7467..8055

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     misc_feature    8241..8381

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     rep_origin      8725..8919

                     /label=pVS1 oriV

                     /note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

     CDS             complement(8985..10058)

                     /codon_start=1

                     /product="replication protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 RepA

                     /translation="MSGRKPSGPVQIGAALGDDLVEKLKAAQAAQRQRIEAEARPGESW

                     QAAADRIRKESRQPPAAGAPSIRKPPKGDEQPDFFVPMLYDVGTRDSRSIMDVAVFRLS

                     KRDRRAGEVIRYELPDGHVEVSAGPAGMASVWDYDLVLMAVSHLTESMNRYREGKGDKP

                     GRVFRPHVADVLKFCRRADGGKQKDDLVETCIRLNTTHVAMQRTKKAKNGRLVTVSEGE

                     ALISRYKIVKSETGRPEYIEIELADWMYREITEGKNPDVLTVHPDYFLIDPGIGRFLYR

                     LARRAAGKAEARWLFKTIYERSGSAGEFKKFCFTVRKLIGSNDLPEYDLKEEAGQAGPI

                     LVMRYRNLIEGEASAGS"

     CDS             complement(10487..11116)

                     /codon_start=1

                     /product="stability protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 StaA

                     /translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR

                     DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP

                     VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI

                     LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"

ORIGIN

        1 tttcacgccc ttttaaatat ccgattattc taataaacgc tcttttctct taggtttacc

       61 cgccaatata tcctgtcaaa cactgatagt ttaaactgaa ggcgggaaac gacaatctga

      121 tccaagctca agctgctcta gcattcgcca ttcaggctgc gcaactgttg ggaagggcga

      181 tcggtgcggg cctcttcgct attacgccag ctggcgaaag ggggatgtgc tgcaaggcga

      241 ttaagttggg taacgccagg gttttcccag tcacgacgtt gtaaaacgac ggccagtgcc

      301 aagcttgcat gcctgcaggt ccccagatta gccttttcaa tttcagaaag aatgctaacc

      361 cacagatggt tagagaggct tacgcagcag gtctcatcaa gacgatctac ccgagcaata

      421 atctccagga aatcaaatac cttcccaaga aggttaaaga tgcagtcaaa agattcagga

      481 ctaactgcat caagaacaca gagaaagata tatttctcaa gatcagaagt actattccag

      541 tatggacgat tcaaggcttg cttcacaaac caaggcaagt aatagagatt ggagtctcta

      601 aaaaggtagt tcccactgaa tcaaaggcca tggagtcaaa gattcaaata gaggacctaa

      661 cagaactcgc cgtaaagact ggcgaacagt tcatacagag tctcttacga ctcaatgaca

      721 agaagaaaat cttcgtcaac atggtggagc acgacacact tgtctactcc aaaaatatca

      781 aagatacagt ctcagaagac caaagggcaa ttgagacttt tcaacaaagg gtaatatccg

      841 gaaacctcct cggattccat tgcccagcta tctgtcactt tattgtgaag atagtggaaa

      901 aggaaggtgg ctcctacaaa tgccatcatt gcgataaagg aaaggccatc gttgaagatg

      961 cctctgccga cagtggtccc aaagatggac ccccacccac gaggagcatc gtggaaaaag

     1021 aagacgttcc aaccacgtct tcaaagcaag tggattgatg tgatatctcc actgacgtaa

     1081 gggatgacgc acaatcccac tatccttcgc aagacccttc ctctatataa ggaagttcat

     1141 ttcatttgga gagaacacgg gggactctag agttatcaac aagtttgtac