• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 克隆菌株：大肠杆菌Stbl3
• 质粒简介：                pJL-SaKKH-BE3是一个大鼠基因哺乳过表达质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G201164ZD32.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                7689 bp ds-DNA     circular SYN 01-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..7689

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     CDS             13..261

                     /codon_start=1

                     /product="uracil-DNA glycosylase inhibitor from a Bacillus 

                     subtilis bacteriophage (Mol et al., 1995)"

                     /label=UGI

                     /translation="TNLSDIIEKETGKQLVIQESILMLPEEVEEVIGNKPESDILVHTA

                     YDESTDENVMLLTSDAPEYKPWALVIQDSNGENKIKML"

     CDS             274..294

                     /codon_start=1

                     /product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus

                     40) large T antigen"

                     /label=SV40 NLS

                     /translation="PKKKRKV"

     CDS             303..320

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /label=6xHis

                     /translation="HHHHHH"

     polyA_signal    349..573

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      complement(1046..1634)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(1805..2665)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(2666..2770)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     enhancer        3040..3419

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        3420..3623

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     promoter        3665..3683

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     CDS             3697..4383

                     /codon_start=1

                     /product="cytidine deaminase (C to U editing enzyme) from 

                     rat"

                     /label=APOBEC-1

                     /note="can use ssDNA as a substrate (Komor et al., 2016)"

                     /translation="MSSETGPVAVDPTLRRRIEPHEFEVFFDPRELRKETCLLYEINWG

                     GRHSIWRHTSQNTNKHVEVNFIEKFTTERYFCPNTRCSITWFLSWSPCGECSRAITEFL

                     SRYPHVTLFIYIARLYHHADPRNRQGLRDLISSGVTIQIMTEQESGYCWRNFVNYSPSN

                     EAHWPRYPHLWVRLYVLELYCIILGLPPCLNILRRKQPQLTFFTIALQSCHYQRLPPHI

                     LWATGLK"

     misc_feature    4432..7596

                     /label=SaKKHCas9n

     CDS             7597..7617

                     /codon_start=1

                     /product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus

                     40) large T antigen"

                     /label=SV40 NLS

                     /translation="PKKKRKV"

     CDS             7624..7689

                     /codon_start=1

                     /product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an

                     enterokinase cleavage site"

                     /label=3xFLAG

                     /translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"

ORIGIN

        1 tctggtggtt ctactaatct gtcagatatt attgaaaagg agaccggtaa gcaactggtt

       61 atccaggaat ccatcctcat gctcccagag gaggtggaag aagtcattgg gaacaagccg

      121 gaaagcgata tactcgtgca caccgcctac gacgagagca ccgacgagaa tgtcatgctt

      181 ctgactagcg acgcccctga atacaagcct tgggctctgg tcatacagga tagcaacggt

      241 gagaacaaga ttaagatgct ctctggtggt tctcccaaga agaagaggaa agtctaaccg

      301 gtcatcatca ccatcaccat tgagtttaaa cccgctgatc agcctcgact gtgccttcta

      361 gttgccagcc atctgttgtt tgcccctccc ccgtgccttc cttgaccctg gaaggtgcca

      421 ctcccactgt cctttcctaa taaaatgagg aaattgcatc gcattgtctg agtaggtgtc

      481 attctattct ggggggtggg gtggggcagg acagcaaggg ggaggattgg gaagacaata

      541 gcaggcatgc tggggatgcg gtgggctcta tggcttctga ggcggaaaga accagctggg

      601 gctcgatacc gtcgacctct agctagagct tggcgtaatc atggtcatag ctgtttcctg

      661 tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac acaacatacg agccggaagc ataaagtgta

      721 aagcctaggg tgcctaatga gtgagctaac tcacattaat tgcgttgcgc tcactgcccg

      781 ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc tgcattaatg aatcggccaa cgcgcgggga

      841 gaggcggttt gcgtattggg cgctcttccg cttcctcgct cactgactcg ctgcgctcgg

      901 tcgttcggct gcggcgagcg gtatcagctc actcaaaggc ggtaatacgg ttatccacag

      961 aatcagggga taacgcagga aagaacatgt gagcaaaagg ccagcaaaag gccaggaacc

     1021 gtaaaaaggc cgcgttgctg gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac gagcatcaca

     1081 aaaatcgacg ctcaagtcag aggtggcgaa acccgacagg actataaaga taccaggcgt

     1141 ttccccctgg aagctccctc gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt accggatacc

     1201 tgtccgcctt tctcccttcg ggaagcgtgg cgctttctca tagctcacgc tgtaggtatc

     1261 tcagttcggt gtaggtcgtt cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc cccgttcagc

     1321 ccgaccgctg cgccttatcc ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta agacacgact

     1381 tatcgccact ggcagcagcc actggtaaca ggattagcag agcgaggtat gtaggcggtg

     1441 ctacagagtt cttgaagtgg tggcctaact acggctacac tagaagaaca gtatttggta

     1501 tctgcgctct gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct tgatccggca

     1561 aacaaaccac cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt acgcgcagaa

     1621 aaaaaggatc tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg

     1681 aaaactcacg ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc acctagatcc

     1741 ttttaaatta aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa acttggtctg

     1801 acagttacca atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta tttcgttcat

     1861 ccatagttgc ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc ttaccatctg

     1921 gccccagtgc tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat ttatcagcaa

     1981 taaaccagcc agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta tccgcctcca

     2041 tccagtctat taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt aatagtttgc

     2101 gcaacgttgt tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggtatggctt

     2161 cattcagctc cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg ttgtgcaaaa

     2221 aagcggttag ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc gcagtgttat

     2281 cactcatggt tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc gtaagatgct

     2341 tttctgtgac tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga atagtgtatg cggcgaccga

     2401 gttgctcttg cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc acatagcaga actttaaaag

     2461 tgctcatcat tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aaggatctta ccgctgttga

     2521 gatccagttc gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc ttcagcatct tttactttca

     2581 ccagcgtttc tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag ggaataaggg

     2641 cgacacggaa atgttgaata ctcatactct tcctttttca atattattga agcatttatc

     2701 agggttattg tctcatgagc ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag

     2761 gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgacgt cgacggatcg ggagatcgat

     2821 ctcccgatcc cctagggtcg actctcagta caatctgctc tgatgccgca tagttaagcc

     2881 agtatctgct ccctgcttgt gtgttggagg tcgctgagta gtgcgcgagc aaaatttaag

     2941 ctacaacaag gcaaggcttg accgacaatt gcatgaagaa tctgcttagg gttaggcgtt

     3001 ttgcgctgct tcgcgatgta cgggccagat atacgcgttg acattgatta ttgactagtt

     3061 attaatagta atcaattacg gggtcattag ttcatagccc atatatggag ttccgcgtta

     3121 cataacttac ggtaaatggc ccgcctggct gaccgcccaa cgacccccgc ccattgacgt

     3181 caataatgac gtatgttccc atagtaacgc caatagggac tttccattga cgtcaatggg

     3241 tggagtattt acggtaaact gcccacttgg cagtacatca agtgtatcat atgccaagta

     3301 cgccccctat tgacgtcaat gacggtaaat ggcccgcctg gcattatgcc cagtacatga

     3361 ccttatggga ctttcctact tggcagtaca tctacgtatt agtcatcgct attaccatgg

     3421 tgatgcggtt ttggcagtac atcaatgggc gtggatagcg gtttgactca cggggatttc

     3481 caagtctcca ccccattgac gtcaatggga gtttgttttg gcaccaaaat caacgggact

     3541 ttccaaaatg tcgtaacaac tccgccccat tgacgcaaat gggcggtagg cgtgtacggt

     3601 gggaggtcta tataagcaga gctggtttag tgaaccgtca gatccgctag agatccgcgg

     3661 ccgctaatac gactcactat agggagagcc gccaccatga gctcagagac tggcccagtg

     3721 gctgtggacc ccacattgag acggcggatc gagccccatg agtttgaggt attcttcgat

     3781 ccgagagagc tccgcaagga gacctgcctg ctttacgaaa ttaattgggg gggccggcac

     3841 tccatttggc gacatacatc acagaacact aacaagcacg tcgaagtcaa cttcatcgag

     3901 aagttcacga cagaaagata tttctgtccg aacacaaggt gcagcattac ctggtttctc

     3961 agctggagcc catgcggcga atgtagtagg gccatcactg aattcctgtc aaggtatccc

     4021 cacgtcactc tgtttattta catcgcaagg ctgtaccacc acgctgaccc ccgcaatcga

     4081 caaggcctgc gggatttgat ctcttcaggt gtgactatcc aaattatgac tgagcaggag

     4141 tcaggatact gctggagaaa ctttgtgaat tatagcccga gtaatgaagc ccactggcct