• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 筛选标记：红色荧光蛋白mCherry
• 克隆菌株：大肠杆菌Stbl3
• 质粒简介：               pHR_Gal4UAS_humanIL-2_T2A_MIP1α_PGK_mCherry是一个哺乳细胞抗体质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G204150K62Y.png

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LOCUS       Exported               10824 bp ds-DNA     circular SYN 04-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..10824

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     LTR             61..294

                     /label=3' LTR (Delta-U3)

                     /note="self-inactivating 3' long terminal repeat (LTR) from

                     HIV-1"

     promoter        1126..1230

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     CDS             1231..2091

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     rep_origin      2262..2850

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     promoter        3096..3425

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      3276..3411

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     intron          4559..4624

                     /label=small t intron

                     /note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron"

     CDS             4754..4774

                     /codon_start=1

                     /product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus

                     40) large T antigen"

                     /label=SV40 NLS

                     /translation="PKKKRKV"

     polyA_signal    5199..5333

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     LTR             5502..6135

                     /label=3' LTR

                     /note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"

     misc_feature    6182..6307

                     /label=HIV-1 Psi

                     /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 

                     type 1"

     misc_feature    6799..7032

                     /label=RRE

                     /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 

                     Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 

                     cytoplasm."

     misc_feature    7544..7661

                     /label=cPPT/CTS

                     /note="central polypurine tract and central termination 

                     sequence of HIV-1"

     misc_feature    8001..8459

                     /label=IL-2

     CDS             8001..8060

                     /codon_start=1

                     /product="human interleukin-2 signal sequence"

                     /label=IL-2 signal sequence

                     /translation="MYRMQLLSCIALSLALVTNS"

     misc_feature    8460..8471

                     /label=Furin Cleavage

     CDS             8472..8525

                     /codon_start=1

                     /product="2A peptide from Thosea asigna virus capsid 

                     protein"

                     /label=T2A

                     /note="Eukaryotic ribosomes fail to insert a peptide bond 

                     between the Gly and Pro residues, yielding separate 

                     polypeptides."

                     /translation="EGRGSLLTCGDVEENPGP"

     CDS             8526..8804

                     /codon_start=1

                     /label=human CCL3 (MIP-1a)

                     /translation="MQVSTAALAVLLCTMALCNQFSASLAADTPTACCFSYTSRQIPQN

                     FIADYFETSSQCSKPGVIFLTKRSRQVCADPSEEWVQKYVSDLELSA"

     promoter        8927..9426

                     /label=PGK promoter

                     /note="mouse phosphoglycerate kinase 1 promoter"

     CDS             9447..10157

                     /codon_start=1

                     /product="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein

                     (Shaner et al., 2004)"

                     /label=mCherry

                     /note="mammalian codon-optimized"

                     /translation="MVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEG

                     TQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNF

                     EDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALK

                     GEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERA

                     EGRHSTGGMDELYK"

     misc_feature    10234..10822

                     /label=WPRE

                     /note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional 

                     regulatory element"

ORIGIN

        1 cgataccgtc gaccaaggca gctgtagatc ttagccactt tttaaaagaa aaggggggac

       61 tggaagggct aattcactcc caacgaagac aagatctgct ttttgcttgt actgggtctc

      121 tctggttaga ccagatctga gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta

      181 agcctcaata aagcttgcct tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact

      241 ctggtaacta gagatccctc agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagcatct

      301 agaattaatt ccgtgtattc tatagtgtca cctaaatcgt atgtgtatga tacataaggt

      361 tatgtattaa ttgtagccgc gttctaacga caatatgtac aagcctaatt gtgtagcatc

      421 tggcttactg aagcagaccc tatcatctct ctcgtaaact gccgtcagag tcggtttggt

      481 tggacgaacc ttctgagttt ctggtaacgc cgtcccgcac ccggaaatgg tcagcgaacc

      541 aatcagcagg gtcatcgcta gccagatcct ctacgccgga cgcatcgtgg ccggcatcac

      601 cggcgccaca ggtgcggttg ctggcgccta tatcgccgac atcaccgatg gggaagatcg

      661 ggctcgccac ttcgggctca tgagcgcttg tttcggcgtg ggtatggtgg caggccccgt

      721 ggccggggga ctgttgggcg ccatctcctt gcatgcacca ttccttgcgg cggcggtgct

      781 caacggcctc aacctactac tgggctgctt cctaatgcag gagtcgcata agggagagcg

      841 tcgaatggtg cactctcagt acaatctagc tctgatgccg catagttaag ccagccccga

      901 cacccgccaa cacccgctga cgcgccctga cgggcttgtc tgctcccggc atccgcttac

      961 agacaagctg tgaccgtctc cgggagctgc atgtgtcaga ggttttcacc gtcatcaccg

     1021 aaacgcgcga gacgaaaggg cctcgtgata cgcctatttt tataggttaa tgtcatgata

     1081 ataatggttt cttagacgtc aggtggcact tttcggggaa atgtgcgcgg aacccctatt

     1141 tgtttatttt tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca tgagacaata accctgataa

     1201 atgcttcaat aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc aacatttccg tgtcgccctt

     1261 attccctttt ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc acccagaaac gctggtgaaa

     1321 gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt acatcgaact ggatctcaac

     1381 agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt ttccaatgat gagcactttt

     1441 aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg ccgggcaaga gcaactcggt

     1501 cgccgcatac actattctca gaatgacttg gttgagtact caccagtcac agaaaagcat

     1561 cttacggatg gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg ccataaccat gagtgataac

     1621 actgcggcca acttacttct gacaacgatc ggaggaccga aggagctaac cgcttttttg

     1681 cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg aaccggagct gaatgaagcc

     1741 ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa tggcaacaac gttgcgcaaa

     1801 ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac aattaataga ctggatggag

     1861 gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg gtttattgct

     1921 gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca ttgcagcact ggggccagat

     1981 ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga gtcaggcaac tatggatgaa

     2041 cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc tcactgatta agcattggta actgtcagac

     2101 caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt taaaaggatc

     2161 taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc

     2221 cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg

     2281 cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg

     2341 gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc gcagatacca

     2401 aatactgtcc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg

     2461 cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg

     2521 tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga

     2581 acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga actgagatac

     2641 ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat

     2701 ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc

     2761 tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctc