• 规格：20μl质粒
• 质粒图谱1： png/1-1F92FZ136110.png

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LOCUS       Exported               12700 bp ds-DNA     circular SYN 27-SEP-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

ACCESSION   .

VERSION     .

KEYWORDS    Lenti-Cas9-Puro

SOURCE      synthetic DNA construct

  ORGANISM  synthetic DNA construct

REFERENCE   1  (bases 1 to 12700)

  AUTHORS   .

  TITLE     Direct Submission

  JOURNAL   Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid

            http://www.fenghbio.cn

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..12700

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     enhancer        238..617

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        619..817

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     LTR             835..1015

                     /label=5' LTR (truncated)

                     /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"

     misc_feature    1062..1187

                     /label=HIV-1 Psi

                     /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 

                     type 1"

     misc_feature    1680..1913

                     /label=RRE

                     /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 

                     Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 

                     cytoplasm."

     misc_feature    2440..2557

                     /label=cPPT/CTS

                     /note="central polypurine tract and central termination 

                     sequence of HIV-1"

     promoter        2702..2913

                     /label=EF-1-alpha core promoter

                     /note="core promoter for human elongation factor 

                     EF-1-alpha"

     CDS             2938..7041

                     /codon_start=1

                     /product="Cas9 (Csn1) endonuclease from the Streptococcus 

                     pyogenes Type II CRISPR/Cas system"

                     /label=Cas9

                     /note="generates RNA-guided double strand breaks in DNA"

                     /translation="MDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKK

                     NLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEES

                     FLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIK

                     FRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRL

                     ENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQ

                     IGDQYADLFLAAKNLSDAILLSDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVR

                     QQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLL

                     RKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARG

                     NSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEY

                     FTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFD

                     SVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER

                     LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFM

                     QLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGR

                     HKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLY

                     LYYLQNGRDMYVDQELDINRLSDYDVDHIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVP

                     SEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKH

                     VAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYL

                     NAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKT

                     EITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSK

                     ESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGI

                     TIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNE

                     LALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILAD

                     ANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVL

                     DATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGD"

     CDS             7042..7089

                     /codon_start=1

                     /product="bipartite nuclear localization signal from 

                     nucleoplasmin"

                     /label=nucleoplasmin NLS

                     /translation="KRPAATKKAGQAKKKK"

     CDS             7090..7113

                     /codon_start=1

                     /product="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase 

                     cleavage site"

                     /label=FLAG

                     /translation="DYKDDDDK"

     CDS             7123..7179

                     /codon_start=1

                     /product="2A peptide from porcine teschovirus-1 

                     polyprotein"

                     /label=P2A

                     /note="Eukaryotic ribosomes fail to insert a peptide bond 

                     between the Gly and Pro residues, yielding separate 

                     polypeptides."

                     /translation="ATNFSLLKQAGDVEENPGP"

     CDS             7180..7776

                     /codon_start=1

                     /gene="pac from Streptomyces alboniger"

                     /product="puromycin N-acetyltransferase"

                     /label=PuroR

                     /note="confers resistance to puromycin"

                     /translation="TEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIERV

                     TELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLAA

                     QQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETSA

                     PRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGA"

     misc_feature    7792..8380

                     /label=WPRE

                     /note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional 

                     regulatory element"

     LTR             8452..8685

                     /label=3' LTR (Delta-U3)

                     /note="self-inactivating 3' long terminal repeat (LTR) from

                     HIV-1"

     polyA_signal    8717..8941

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      8987..9415

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        9429..9758

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      9609..9744

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     promoter        9806..9853

                     /label=EM7 promoter

                     /note="synthetic bacterial promoter "

     CDS             9872..10246

                     /codon_start=1

                     /gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"

                     /product="antibiotic-binding protein"

                     /label=Zeo

                     /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 

                     Zeocin(TM)"

                     /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD

                     VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR

                     EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"

     polyA_signal    10376..10497

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     rep_origin      complement(10948..11536)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(11707..12567)

                     /codon_start=1

                &n