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- 产品简介
酪酰胺信号放大(TSA，Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白进行标记的酶学检测方法，TSA实验原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应（酪胺盐在HRP催化下形成共价键结合位点)，产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白残基（包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基）结合，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积，使其检测信号得到10-100倍增强。
TSA多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和H2O2的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后通过微波、煮沸、水浴等热修复处理，非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素稳定结合在样本切片蛋白上。再换另一个一抗来进行第二轮孵育，周而复始。等所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，再检测结果。
由于每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。也就是说，使用TSA技术，同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以进行实验。本公司开发的试剂盒所使用的酪胺荧光染料可单独或配合使用以实现单标、双标、三标及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能。
产品组分及配制
荧光光谱数据\
* 以下试剂建议现配现用，用多少配多少
荧光染料工作液配制：将TSA荧光激活剂与FH-XXX荧光试剂按1:50的比例充分混匀后使用
二抗工作液配制：将Polymer-HRP山羊抗鼠/兔二抗与抗体稀释液按1:200的比例充分混匀后使用
注意事项1.开始实验前，应仔细阅读此说明书。
2.FH-XXX荧光试剂在-20℃下均为固态，使用之前需解冻。首次解冻后可选择将荧光试剂进行分装，避免试剂反复冻融。
3.在加入荧光染料反应后，后续步骤均要注意避光处理。
4.荧光染料的使用顺序不受限制，可根据需要自由选择。
5.如荧光背景信号较强，建议增加组织自发荧光淬灭步骤。
6.避免试剂接触眼睛和粘膜，如接触到敏感区域，立即用大量清水冲洗。
7.本试剂仅用于科学研究，不作其他用途。
案例展示如您有任何定制方案需求，请点击咨询在线客服或拨打400-000-7085
