甲基化检测

MSP法:用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化;反之,说明被检测的位点不存在甲基化。

BSP法:用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,则未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计BSP引物进行PCR,在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶,最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化。

 

实验流程图

 

我们的优势:

1.高环评、标准化、开放式实验室,客户可全程跟踪实验;

2.购有热循环仪、PCR仪等先进整套仪器设备;

3.标准的SOP操作规程,确保实验数据真实、客观、可靠!

4.MSP法和BSP法都可接单!

服务价格与周期:

服务项目编号

服务项目内容

服务项目价格

完成周期(工作日)

 

引物设计、合成与优化

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5-7

 

修饰处理与PCR鉴定

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5-7

 

产物回收与测序

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10-15

 

圈点图实验报告分析

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3-5

 

样本准备要求

细胞样本:细胞处理结束后,去除培养液收集细胞沉淀,细胞量≥1*10^6(离心成团米粒大小),液氮速冻保存于-80℃干冰运输。

组织样本:动物冰上取材≥300mg,液氮速冻保存于-80℃冰箱,干冰运输。

全血样本:全血采集于肝素钠抗凝管/冻存管中,体积≥2ml,液氮速冻保存于-80℃干冰运输。

石蜡样本:石蜡包埋切片≥10张,面积>10mm*10mm,厚度5-10um,冰袋运输。

DNA样本:体积≥20ul,浓度100ng/ul,OD值1.8-2.0;DNA总量≥2ug,-20℃保存,冰袋运输。

 

交付标准:

1.完整实验报告一份(包括所用到试剂耗材、仪器设备、操作步骤、原始数据和实验分析结果)。

2.剩余的样本和试剂

 

本公司承诺,检测结果真实、唯一、客观、可信,但不确保得到某预期结果!

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