稳定细胞系构建

       稳定细胞系构建的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志如新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin)等进行筛选,从而获得可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到目的细胞基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。

      丰晖生物制备的慢病毒带有嘌呤霉素(puromycin)抗性,感染目的细胞后,可通过加入puromycin进行筛选,获得稳定表达shRNA或者某特定基因的细胞株。

 

 

慢病毒稳定细胞系构建流程


服务特点:

  • 稳定表达:经慢病毒感染后筛选获得的细胞系,可稳定表达外源基因;

  • 周期短:采用慢病毒携带的抗性进行筛选,最短2周即可获得稳定细胞系;

  • 样选择:多种慢病毒载体可供选择,携带抗性筛选标记和荧光标记均可。

 

服务价格与周期:

 

 

服务编号 服务内容 服务价格 服务周期(工作日)
AS1003-1 慢病毒稳定细胞系构建 详询网站客服 10-15
AS1003-2 稳定细胞系鉴定(Western blot法) 详询网站客服 5-7

 

服务说明:

  • 客户需提供生长状态良好的目的细胞及足量的慢病毒;

  • 如需采用Western blot法鉴定稳定细胞系的蛋白表达,请提供目的蛋白一抗或者我公司代购;剩余抗体实验完成后返还给客户。

 

交付标准:

  • 提供稳定细胞株一瓶

  • 完整实验报告(包括细胞培养条件,细胞图片及鉴定结果)一份

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